正确答案: ABDEF

每条引物长度通常为18~25个核苷酸 引物3'端的第1、2个碱基必须与模板严格配对 引物5'端可加修饰成分,如酶切位点、引入突变位点、生物素标记等 两引物有匹配的GC含量和相似的退火温度 引物序列通常位于基因组DNA的高度保守区

题目: PCR引物设计是实验成败的关键环节。

解析:引物设计的原则包括:①引物长度以18~25bp为宜,引物过长,模板结合不充分,导致扩增产物减少;引物过短(<15bp),导致非特异性扩增,降低产物的特异性。②引物序列通常位于基因组DNA的高度保守区。一对引物间不应存在互补序列,避免形成引物二聚体。③两引物有匹配的GC含量和相似的退火温度,否则会影响扩增的效率和特异性。通常G+C含量为45%~55%。④引物3'端的第1、2个碱基影响Taq DNA聚合酶的延伸效率,影响PCR的扩增效率和特异性,必须与模板严格配对;引物5'端可加修饰成分,如酶切位点、引入突变位点、启动子序列、生物素、荧光素和地高辛标记等,以便对产物进行分析和克隆等。

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举一反三的答案和解析:

  • [单选题]变性珠蛋白小体生成试验阴性,参考值是含5个以上珠蛋白小体的红细胞不超过
  • 30%


  • [单选题]以神经毒素致病的细菌是
  • 肉毒梭菌


  • [单选题]按NCCLSEP6进行线性评价时,高值标本的值应该
  • 高于线性上限30%


  • [单选题]下列各项功能性描述中,属于孕激素生理作用的是
  • 促进子宫内膜增生和腺体分泌


  • [单选题]免疫荧光显微技术中,特异性最高,非特异性荧光染色因素最少的方法是
  • 直接法

  • 解析:荧光抗体染色技术直接法:将特异荧光抗体直接滴加于标本上,使之与抗原发生特异性结合,本法优点是操作简便,特异性高,非特异性荧光染色因素最少,缺点是敏感度偏低,每检查一种抗原需制备相应的特异荧光抗体。

  • [单选题]下列哪一项是尼曼-匹克细胞形态学的突出特征
  • 浆内含有脂滴或呈泡沫状、蜂窝状

  • 解析:尼曼-匹克细胞胞体巨大,直径20~90pm,呈圆形、椭圆形或三角形,胞核小,1~2个,圆形、椭圆形偏位。胞质丰富,经美蓝-伊红染色后呈浅蓝色,有的细胞胞质中充满大小均匀、透明的脂滴,形如桑葚状。有的则脂滴不甚明显,而呈泡沫状或蜂窝状。

  • [单选题]国内外制定的血脂测定技术目标中所要求的甘油三酯的不准确度和不精密度分别为( )
  • ≤±5%,≤5%


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    推荐下载科目: 重症医学(正高) 临床医学检验临床血液技术(正高) 疼痛学(副高) 中西医结合骨伤科学主治医师(代码:329) 核医学技术中级职称(代码:377) 消毒技术中级职称(代码:385) 住院医师规培(口腔正畸科) 医学临床三基(药师) 中医临床三基(医师) CT技师
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