正确答案: ABDEF

每条引物长度通常为18~25个核苷酸 引物3'端的第1、2个碱基必须与模板严格配对 引物5'端可加修饰成分,如酶切位点、引入突变位点、生物素标记等 两引物有匹配的GC含量和相似的退火温度 引物序列通常位于基因组DNA的高度保守区

题目: PCR引物设计是实验成败的关键环节。

解析:引物设计的原则包括:①引物长度以18~25bp为宜,引物过长,模板结合不充分,导致扩增产物减少;引物过短(<15bp),导致非特异性扩增,降低产物的特异性。②引物序列通常位于基因组DNA的高度保守区。一对引物间不应存在互补序列,避免形成引物二聚体。③两引物有匹配的GC含量和相似的退火温度,否则会影响扩增的效率和特异性。通常G+C含量为45%~55%。④引物3'端的第1、2个碱基影响Taq DNA聚合酶的延伸效率,影响PCR的扩增效率和特异性,必须与模板严格配对;引物5'端可加修饰成分,如酶切位点、引入突变位点、启动子序列、生物素、荧光素和地高辛标记等,以便对产物进行分析和克隆等。

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举一反三的答案和解析:

  • [单选题]监测再次心肌梗死的首选标志物是
  • CK-MB

  • 解析:CK-MB是监测再次心肌梗死的首选标志物。

  • [单选题]原发性巨球蛋白血症骨髓检查的特点是
  • 骨髓穿刺时,常可出现干抽


  • [单选题]卵磷脂小体减少常见于( )。
  • 前列腺炎


  • [单选题]在放射免疫分析中常用到RIA标准曲线(Standard curve),其作用是
  • 用得到的计数率去推算试样中所含样品的浓度或含量


  • [单选题]下列有关溶血性贫血的叙述,哪项是正确的( )
  • 以上都是


  • [单选题]下列哪项不符合尼曼-匹克细胞特点
  • POX染色呈阳性

  • 解析:尼曼-匹克细胞PAS染色,空泡壁呈弱阳性,空泡中心为阴性。酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、过氧化物酶染色均为阴性反应。

  • [单选题]自动生化分析仪中所指的交叉污染主要来自
  • 样本之间


  • [单选题]肝素抗凝血的主要机制是
  • 增强抗凝血酶Ⅲ与凝血酶的亲和力


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