正确答案: ABDEF
每条引物长度通常为18~25个核苷酸 引物3'端的第1、2个碱基必须与模板严格配对 引物5'端可加修饰成分,如酶切位点、引入突变位点、生物素标记等 两引物有匹配的GC含量和相似的退火温度 引物序列通常位于基因组DNA的高度保守区
题目:
PCR引物设计是实验成败的关键环节。
解析:引物设计的原则包括:①引物长度以18~25bp为宜,引物过长,模板结合不充分,导致扩增产物减少;引物过短(<15bp),导致非特异性扩增,降低产物的特异性。②引物序列通常位于基因组DNA的高度保守区。一对引物间不应存在互补序列,避免形成引物二聚体。③两引物有匹配的GC含量和相似的退火温度,否则会影响扩增的效率和特异性。通常G+C含量为45%~55%。④引物3'端的第1、2个碱基影响Taq DNA聚合酶的延伸效率,影响PCR的扩增效率和特异性,必须与模板严格配对;引物5'端可加修饰成分,如酶切位点、引入突变位点、启动子序列、生物素、荧光素和地高辛标记等,以便对产物进行分析和克隆等。
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举一反三的答案和解析:
[多选题]关于慢性淋巴细胞白血病,叙述正确的是
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[多选题]依据ISO15189,关于实验室设备,实验室必须保持影响检验性能的每件设备的记录,在记录中必须有的是
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到货日期和投入运行日期
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[多选题]下列有关变形杆菌的叙述中,正确的有 ( )
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葡萄糖酸盐阴性