正确答案: ABDEF

每条引物长度通常为18～25个核苷酸 引物3'端的第1、2个碱基必须与模板严格配对 引物5'端可加修饰成分，如酶切位点、引入突变位点、生物素标记等 两引物有匹配的GC含量和相似的退火温度 引物序列通常位于基因组DNA的高度保守区

题目： PCR引物设计是实验成败的关键环节。

解析：引物设计的原则包括：①引物长度以18～25bp为宜，引物过长，模板结合不充分，导致扩增产物减少；引物过短(＜15bp)，导致非特异性扩增，降低产物的特异性。②引物序列通常位于基因组DNA的高度保守区。一对引物间不应存在互补序列，避免形成引物二聚体。③两引物有匹配的GC含量和相似的退火温度，否则会影响扩增的效率和特异性。通常G+C含量为45%～55%。④引物3'端的第1、2个碱基影响Taq DNA聚合酶的延伸效率，影响PCR的扩增效率和特异性，必须与模板严格配对；引物5'端可加修饰成分，如酶切位点、引入突变位点、启动子序列、生物素、荧光素和地高辛标记等，以便对产物进行分析和克隆等。

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举一反三的答案和解析：

[单选题]在总补体活性测定时，所测定的是

补体溶解红细胞的活性

解析：补体总活性测定原理：补体最主要的活性是溶细胞作用。特异性抗体与红细胞结合后可激活补体，导致红细胞表面形成跨膜小孔，使胞外水分渗入，引起红细胞肿胀而发生溶血。

[单选题]经典的常规使用的第一代测序技术是

Sanger链末端终止法

[单选题]可增强链球菌扩散能力的致病物质是

链球菌DNA酶

[单选题]TSH、LH、FSH与hCG的结构差别是

β亚基的后30个氨基酸序列